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二、微生物的选择培养与计数
一、选择培养基
基础梳理
- 实验室中微生物筛选的基本原理：人为提供有利于 ，同时抑制或阻止其他微生物的生长
- 选择培养基的概念：在微生物学中，将 特定种类的微生物生长，同时 或
其他种类微生物生长的培养基，叫选择培养基
1.选择培养基上生长的微生物=目的菌（ ）
①
②
③
④
⑤
⑥
2.微生物的培养条件：
三、微生物的数量测定
1.稀释涂布平板法计数的原理：当样品的稀释足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于
2.稀释涂布平板计数法统计的平板菌落数范围：
3.稀释涂布平板法的统计方法：在同一稀释度下，应至少对个平板进行重复计数，然后求出平均值
4.稀释涂布平板计数的特点及原因分析：统计的菌落数往往比活菌的实际数目，这是因为两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是。因此。统计结果一般用
而不是用来表示
- 为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数
随堂训练
1.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是( )
A.菌落中的细菌数目是固定的
B.平板上的一个菌落就是一个细菌
C.通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同
D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
2.下列有关培养基和菌种鉴定的叙述正确的是( )
A.制作固体培养基必须加入的物质是琼脂
B.可利用液体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
C.菌落的表面光滑与否、有无荚膜是R型和S型菌种鉴定的依据
D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌
3.在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106培养基上筛选出大约120个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是( )
A.可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
B.让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误
C.甲同学出现这种结果的原因可能是土样不同，也可能是操作过程出了问题
D.A、B选项的实验思路都遵循了实验的对照原则和平行重复原则
4.下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的示意图,有关叙述错误的是( )
A.在配制步骤②、③ 的培养基时,应先调pH值后高压蒸汽灭菌B.步骤③ 纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落C.步骤③ 采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④ 挑取③ 中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力
5.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )
A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
6.分离土壤中分解尿素的细菌时,对培养基的要求是( )①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦ B.①③⑤⑧ C.②④⑥⑧ D.①④⑥⑦
7.日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题:
1.该实验需制备培养基,培养基一般都含有水、碳源、__________。
2.据图,两电视台均采用__________法接种,该方法需要__________(多选).
A.接种环 B.酒精灯 C.移液管 D.涂布器 E.无菌水
3.通过观察菌落的__________,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因是:__________。
4.按图操作取样面积,实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将10<Object: word/embeddings/oleObject1.bin>菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1<Object: word/embeddings/oleObject2.bin>稀释倍数为<Object: word/embeddings/oleObject3.bin>的样品液接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为__________个/平方厘米。该实验对照组该如何设置__________。
答案以及解析
1.答案：D
解析：
2.答案：D
解析：
3.答案：D
解析：
4.答案：C
解析：在配制步骤② 、③ 所用的培养基时,应先调pH后高压蒸汽灭菌,A正确;步骤③ 纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落,B正确;要筛选出能高效分解尿素的细菌,所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮,因此步骤③ 所用的培养基不能是牛肉膏蛋白胨培养基,C错误;步骤④ 挑取③ 中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D正确。
5.答案：A
解析：A、酚红指示剂只能用来检测尿素分解菌，A正确；B、二苯胺试剂常用来进行DNA的鉴定，B错误；C、苏丹Ⅲ试剂可以用来检测脂肪，C错误；D、双缩脲试剂可以用来检测蛋白质，D错误．故选：A．
6.答案：B
解析：
7.答案：
1.氮源和无机盐;
2.稀释涂布平板; BCDE;
3.形态、大小; 手机的取样和马桶的取样都不相同4.2×104; 取培养基涂布0.1mL无菌水进行培养
解析：1.微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。2.根据图形分析,该实验的接种方法为稀释涂布平板法,该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。3.不同的菌落形态、大小不同,图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落,即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。4.根据提供的数据进行计算,某手机屏幕的细菌数=(48+50+52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)=2×104(个/平方厘米)。
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